www.soberreading.com 硕博园-GST pull-down 实验 GST pull-down 实验一、实验目的和原理: GST(谷胱甘肽巯基转移酶) 蛋白是机体内重要的代谢酶之一,是细胞抗损伤、抗癌变等解毒系统中主要成员,天然大小为 26KD。目前 GST 已成为蛋白表达纯化技术中常用的一个标签蛋白,长度为 231aa,使用重组 DNA 技术将 GST 蛋白基因插入到目的蛋白基因(X)的 C 末端或 N 末端,可实现融合蛋白 X-GST/GST-X的高效表达。 以 GST 作为标签进行融合蛋白表达,原因大致有二:① 它是一个高度可溶的蛋白,希望可以利用它增加外源蛋白的可溶性;② 它可以在大肠杆菌中大量表达,起到提高表达量的作用。 GST 融合蛋白有着很广泛的应用,除了进行蛋白的亲和纯化外,还可以做为诱饵蛋白,进行蛋白质之间相互作用的研究,如,GST pull-down 实验,能捕获到与诱饵蛋白组 cp 的未知靶标蛋白,也可用于鉴定诱饵蛋白和已知的靶标蛋白之间的相...