新海生物科技股份有限公司

qPCR 试用装

（一）TaqMan Master Mix

1、货号：NH9201（EzPlex SNP Genotyping Master Mix）

1）反应体系

2）反应条件

2、货号：NH9246（NuHi® U+ TaqMan Master Mix（ROX free））

1）反应体系

2）反应条件

组分 用量（25μL/反应） 终浓度 客户

自备

EzPlex SNP Genotyping Master Mix（2×） 12.5 µL 1×

上游引物（浓度25μM）* 0.5-1µL 200-400nM* √

下游引物（浓度25μM）* 0.5-1 µL 200-400nM* √

PCR探针(25μM) * 0.2µL 200nM* √

模板 1µL 1-100ng √

灭菌水 补齐至 25µL / √

步骤 温度 时间

预变性 95℃ 10分钟

40-50 PCR 循环

变性 95℃ 5秒

退火/延伸 60℃ 40秒

组分 用量（25μL/反应） 终浓度 客户

自备

NuHi® U+ TaqMan Master Mix（ROX free）(ROX free) 12.5 µL 1×

上游引物（浓度10μM）* 0.5-1µL 200-400nM* √

下游引物（浓度10μM）* 0.5-1 µL 200-400nM* √

探针 * 0.5-1µL 200-400nM* √

DNA模板 1µL 1-100ng √

灭菌水 补齐至 25µL / √

步骤 温度 时间

预变性 95℃ 10分钟

40-50PCR 循环

变性 95℃ 5秒

退火/延伸 60℃ 40秒

新海生物科技股份有限公司

（二）NuHi® SNP Mix

1、货号：NH9216（NuHi® SNP Mix）

1）反应体系

2）反应条件

（三）NuHi® Ez Advanced SNP Mix(ROX free)

1、货号：NH9240（EzPlex Direct qpcr Master Mix）

1）反应体系

2）反应条件

组分 用量（25μL/反应） 终浓度 客户

自备

NuHi® SNP Mix（2×） 12.5 µL 1×

上游引物（浓度10μM）* 1.25µL 500nM* √

下游引物（浓度10μM）* 1.25 µL 500nM* √

等位基因1探针(10μM) * 0.5µL 200nM* √

等位基因2探针(10μM) * 0.5µL 200nM* √

DNA模板 1µL 1-100ng √

灭菌水 补齐至 25µL / √

步骤 温度 时间

预变性 95℃ 5-10分钟

40-50 PCR 循环

变性 95℃ 10秒

退火/延伸 60℃ 30-40秒

组分 用量（25μL/反应） 终浓度 客户

自备

EzPlex Direct qpcr Master Mix（2×） 12.5 µL 1×

上游引物（浓度25μM）* 0.5µL 500nM* √

下游引物（浓度25μM）* 0.5 µL 500nM* √

等位基因1探针(25μM) * 0.2µL 200nM* √

等位基因2探针(25μM) * 0.2µL 200nM* √

模板 1-5µL 1-100ng √

灭菌水 补齐至 25µL / √

步骤 温度 时间

热启动 95℃ 10分钟

45 PCR 循环

变性 95℃ 10秒

退火/延伸 60℃ 40秒

新海生物科技股份有限公司

2、货号：NH9239（NuHi® U+ Ez Advanced SNP Mix(ROX free)）

1）反应体系

2）反应条件

（四）NuHi® Ez Advanced U+ SNP Mix-AP

1、货号：NH9261（NuHi® Ez Advanced U+ SNP Mix-AP）

1）反应体系

2）反应条件

组分 用量（25μL/反应） 终浓度 客户

自备

NuHi® U+ Ez Advanced SNP Mix(ROX free)（2×） 12.5 µL 1×

上游引物（浓度25μM）* 0.5µL 500nM* √

下游引物（浓度25μM）* 0.5 µL 500nM* √

等位基因1探针(25μM) * 0.2µL 200nM* √

等位基因2探针(25μM) * 0.2µL 200nM*

模板 1µL 1-100ng √

灭菌水 补齐至 25µL / √

步骤 温度 时间

预变性 95℃ 10分钟

45 PCR 循环

变性 95℃ 10秒

退火/延伸 60℃ 40秒

组分 用量（25μL/反应） 终浓度 客户

自备

NuHi® Ez Advanced U+ SNP Mix-AP（2×） 12.5 µL 1×

上游引物（浓度25μM）* 0.5-1µL 200-400nM* √

下游引物（浓度25μM）* 0.5-1 µL 200-400nM* √

PCR探针(25μM) * 0.2µL 200nM* √

模板 1-5µL 0.05-100ng √

灭菌水 补齐至 25µL / √

步骤 温度 时间

预变性 95℃ 0.5-5分钟

40-50 PCR 循环

变性 95℃ 5-15秒

退火/延伸 60℃ 30-45秒